試片表面生物沉積膜形貌及其AFM圖像分析研究不同的浸蝕時(shí)間生長(zhǎng)出的生物沉積膜。圖1分別為未接種SRB的空白培養(yǎng)基中浸蝕14天(a,b),接種SRB的培養(yǎng)基中浸蝕3天(c,d),浸蝕14天(e,f)的H7021AB試片表面的AFM2D和3D圖像。

從圖中可以看出,在空白培養(yǎng)基中浸蝕14天的試片表面高低起伏較明顯,有峰狀白色凸起,在試片表面呈顆粒狀均勻分布。在接種SRB的培養(yǎng)基中浸蝕3天的試片表面發(fā)現(xiàn)有同樣的白色凸起,分布較為零散,且可發(fā)現(xiàn)單個(gè)形態(tài)清晰的SRB細(xì)胞,其尺寸為1167μm×0153μm×0123μm。從立體圖(圖1b)可見(jiàn)細(xì)胞周?chē)采w有不完整的生物沉積膜層。浸蝕14天的試片表面已逐漸趨于平整,有白色凸起均勻分布,基本覆蓋了整個(gè)試片,在其表面發(fā)現(xiàn)的SRB細(xì)胞長(zhǎng)約11792μm,已逐漸被生物沉積膜覆蓋,該試片上的生物沉積膜層要明顯比浸蝕3天的生物沉積膜層厚。對(duì)試片表面峰狀凸出的白色物體進(jìn)行X2射線能譜分析(圖2),其主要無(wú)機(jī)成分為Cu和S;對(duì)試片表面進(jìn)行傅立葉紅外光譜分析(圖3),根據(jù)光譜圖分析可推測(cè)其主要成分是蛋白質(zhì)及多糖類(lèi)物質(zhì),說(shuō)明生物沉積膜的主要成分為銅的硫化物等腐蝕產(chǎn)物、SRB代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基的累積。

利用軟件對(duì)上圖進(jìn)行分析得到表征試片表面粗糙度的相關(guān)參數(shù)。其中,Ra為輪廓算術(shù)平均偏差,即試片表面各點(diǎn)相對(duì)于零平面的高度數(shù)值絕對(duì)值的算術(shù)平均值,Ra=1NΣNf=1|Zf|;Rz為微觀不平度十點(diǎn)高度,即試片表面最高的5個(gè)峰點(diǎn)與最低的5個(gè)谷點(diǎn)相對(duì)于平均高度平面偏差的平均值;Rms為均方根粗糙度(rootmeansquare,Rms),即試片表面各點(diǎn)相對(duì)于零平面的高度數(shù)值的均方根,Rms=ΣZ2iN。上述參數(shù)能夠從不同方面反應(yīng)試片表面的粗糙程度。根據(jù)表1中數(shù)據(jù),浸蝕3d試片的Ra值241284nm,到14d時(shí)減少為171510nm,Rz值由3061785nm減少為2781552nm,Rms值由441742nm減少為251826nm,說(shuō)明浸蝕14d的試片表面粗糙度明顯小于浸蝕3d的,其表面形成了較為平整的生物沉積膜。

利用AFM可以觀測(cè)到SRB生物沉積膜的表面形貌,其三維圖像可以直觀地了解其微觀結(jié)構(gòu)。對(duì)圖像的量化分析可獲取有關(guān)試片表面的粗糙度參數(shù),浸蝕14天的試片表面粗糙度明顯小于浸蝕3天的試片,其表面形成了較為平整的生物沉積膜。